| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » Персональные форумы ... |
 |
Жидкостная хроматография и смежные методы (Liquid chromatography and related techniques) >>>
|
 |
|
Yari Пользователь Ранг: 29 |
 04.08.2006 // 13:30:33
Уважаемый КонстантинС, Подскажите, пожалуйста, как лучше регенирировать С18 колонку после следующего инцендента: по-ошибке в качестве элюэнта взял неподготовленный хлороформ (изначально ЧДА); колонка была в ацетонитриле; ацетонитрилом не отмывается. Заранее благодарен! |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
09.08.2006 // 15:05:55
Вообще, по идее должен. Что значит не отмывается? Потеряла эффективность? |
||
|
Yari Пользователь Ранг: 29 |
12.08.2006 // 19:34:32
Редактировано 1 раз(а) Большое спасибо за внимание к моей проблеме. Ситуация такая: колонка 2.1х100мм при скорости AcN 0.05мл\мин создает обратное давление 16-20 MPa, пробовал отмывать и изопропанолом и потом хлороформом; вроде отмывалась (давление падало до 4-6 MPa (не класс, но работать вроде-бы можно было-бы), однако при переходе в обратном порядке сново увеличивалось до огромных значений. Однако я тут ее починил, однако не без проблем. Я снял выходной фрит (поскольку входной оснащен дополнительным съемным, который на проверку оказался в порядке по текучести) и поместил его перегнаный хлороформ, поболтал поинтенсивней, потом сполоснул AcN и привинтил). Но (досада) при этой опрерации потерял немного сорбента. Колонка заработала, давление бм в порядке. Однако 1) у пиков (я разделяю стероиды) появился небольшой задний "хвост" и 2) при подключении ее к хроматографу в обратном порядке она немного протекает у этого выходного фрита. Это кажется оч странным и, вероятно, способствует появлению хвостов (завихрения потока элюэнта на выходе). Там непосредственно между колонкой и концевым фритом-винтом такая накладная запчасть (видимо, это и есть п/проницаемая часть фрита); может она накладывается в определенном порядке или как-то по особенному закручивать этот фрит? Прочитал в нете на сайте "Элсико", что теперь при каждом запуске системы она будет портиться быстрее, чем обычно "из-за неизбежного проседания сорбента при запуске". Вот такую кашу заварил, хоть  хоть  ... Можно ли еще как нибудь улучшить ситуациюС уважением, Ярослав |
||
|
Олег Пользователь Ранг: 529 |
02.09.2006 // 10:01:18
Редактировано 1 раз(а) Но (досада) при этой опрерации потерял немного сорбента. Колонка заработала, давление бм в порядке. Однако 1) у пиков (я разделяю стероиды) появился небольшой задний "хвост" и 2) при подключении ее к хроматографу в обратном порядке она немного протекает у этого выходного фрита. Это кажется оч странным и, вероятно, способствует появлению хвостов (завихрения потока элюэнта на выходе). Там непосредственно между колонкой и концевым фритом-винтом такая накладная запчасть (видимо, это и есть п/проницаемая часть фрита); Если есть старая колонка, то можно использовать ее насадку. Открыть колонку с той стороны, где недостает сорбента и на кончике скальпеля нанести сорбент, слегка смочить капелькой спирта , с боков очистить избыток сорбента и закрутить. Возможно улучшение. |
||
|
Мадест Пользователь Ранг: 110 |
14.09.2006 // 10:02:05
Константин, вопрос по калонкам фирмы в которой, я так понял, вы работаете, а именно Найтек. Приобрели колонку с амино фазой размер частиц 5 мкм, до этого работали на Bondpak с размером частиц 10 мкм в течении года. Колонка той же длины и сечения. Эффективность колонок примерно одинакова. Неужели у вас такой плохой сорбент? Чем это вызвано. Кроме того по нелепой случайности, нам заказали обращенку длиной 250 мм, возможен ли обмен на такую же, но 150 мм? |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
23.09.2006 // 10:36:20
Добрый день, это колонка Exsil Amino 250x4.0 GL фирмы SGE. Ее эффективность по нитроанлининам, кажется, - порядка 80 тыс. т.т. на метр (по паспорту, уточните). При получении колонки я, как правило, сразу их тестирую в условиях, приведенных на паспорте, во избежание всякого недопонимания. Там элюент гексан-изопропанол, видимо. После тестирования Вы получите хроматограмму, посчитаете эффективность. Если она прилично отличается от паспортной - то колонка автоматически заменяется, без возражений. Но для этого я должен иметь тестовую хроматограму в условиях, аналогичных паспортным, по тому же веществу, или хотя бы подобному (нитроанилины). Далее, для сравнения двух колонок необходимо их протестировать (и получить две хроматограммы) в идентичных условиях, причем перед тестированием каждую колонку необходимо прокондиционировать в выбранных условиях. Эффективность новой 5мкм колонки (если все в ней ок) и старой 10 мкм колонки никак не может быть одинаковой. Кроме того, "старая" - это насколько старая? Кроме того, есть куча нюансов, связанных с объектом разделения. У Вас это сахара? Если да, то я немного удивляюсь, как такой анализ возможен на 250мм 10мкм колонке - глюкоза просто, по идее, не должна разделиться от фруктозы. Так что, давайте разберемся с проблемой. Жду все Ваши хроматограммы с комментариями на мой адрес chromplus*list.ru По поводу обращенки допишу чуть поздее... |
||
|
оля Пользователь Ранг: 21 |
13.10.2006 // 14:15:22
Если возможно посоветуйте, какую фазу (нормальную или обращенную) лучше использовать, порекомендуйте колонку. Вещество - N-[1-{1-(4-хлорфенил)циклобутил}-3-метилбутил]-N,N диметиламина гидрохлорид моногидрат (если проще, то это хлор-бензольное кольцо-циклобутил-СН-углеводородный радикал N-две группы СН3).Вещество мало растворимо в воде, растворимо в этиловом спирте. При анализе пытались использовать колонку Summetry C 18 (УФ-220 нм), результаты не стабильны, пики размыты и т.д.Максимум поглощения по УФ-спектру 220 минимум 212 нм, других нет. Использовала растворители ацетонитрил, воду, буфера, метанол в различных соотношегиях в изократике и градиенте. Варьировала рН от 3 до 7 ацетатным буфером, более 7.5 не позволяет колонка. Пик либо не выходит, либо горбушка Буду благодарна за любой совет. |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
13.10.2006 // 17:35:32
Редактировано 1 раз(а) Оль, похоже, что колонка "лысая", старая. Готовь буфер так - на 100мл воды 1мл триэтиламина, и фосфоркой до рН 3. Дальше смешивай буфер с ацетонитрилом. Думаю ацетонитрила надо будет где-то процентов 70. Ну, это уж тебе виднее. Вещество попробуй растворить в элюенте, мне кажется, выйдет. Да... если колонка старая, то ей понадобится не менее суток, чтоб прикататься под такой элюент. |
||
|
Мадест Пользователь Ранг: 110 |
23.11.2006 // 12:54:27
Константин, извините за невежество интересует вот, что: сегодня к нам приходил мужчина представитель фирмы Сибирская технология, и принес каталог найтек, один в один как ваш, причем говорит, что головной офис у них в Омске и никакого представительства у них в Москве нет. Как это можно обьяснить?
|
||
|
Vasya Пользователь Ранг: 129 |
23.11.2006 // 14:30:33
Попробуйте 0,1% трифторуксусной кислоты в смеси (можно и градиент)с ацетонитрилом. Там pH будет от 2,5. Для на начала попробуйте на той же колонке. А длину волны помимо 220 ни хорошо бы продублировать и на 260 (280) нм. На 220 видно не все то, что хотелось бы увидеть - много чего лишнего. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 401
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
