| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Колонка после недельного простоя - что с ней происходит? >>>
|
 |
|
voodensky Пользователь Ранг: 531 |
 14.10.2019 // 9:35:18
Редактировано 1 раз(а) Почему такой поток? Может у вас все и нормально. Просто пик выходит настолько поздно, что появляется только на третьей хроматограмме. Пробовали закалывать холостой раствор после испытуемых? На нем есть что-нибудь? |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1333 |
14.10.2019 // 10:23:58
|
||
|
ukvukv Пользователь Ранг: 134 |
14.10.2019 // 12:40:15
Добрый день! Ваши рекомендации для проверки идеи в чём растворять CBZ: в метаноле, метанол+вода, метанол+ACN? В ближайшее время сделаю, отпишусь. |
||
|
ukvukv Пользователь Ранг: 134 |
14.10.2019 // 12:50:23
Редактировано 2 раз(а) Колонку жалко. Общее время с учётом промывки 100 % ACN и возвратом к исходному градиенту 40 мин. Время выхода определяемого пика 12 минута. На третей хроматограмме определяемый пик выходит с заданной концентрацией, не суммарной после трёх заколов. После каждых 4-х проб пациентов закалываю холостую пробу для контроля чистоты колонки. Хроматограмма чистая. Может в этом и нет необходимости, но мне так спокойнее. И ещё контроль закалываю как минимум два раза в самом начале, т.е. первая проба и в самом конце, последняя проба, но не заключительный закол. В самом конце идёт холостая проба на методике анализа и ещё раз холостая проба на методике заполнения системы 100% ACN перед выключением на неделю. Может слишком и много лишних процедур, но я так договорился сам с собой, а это порой бывает не просто. |
||
|
vmu Пользователь Ранг: 1337 |
14.10.2019 // 12:55:39
Исходный раствор - в ацетонитриле или в водно-ацетонитрильной смеси. Разбавленный раствор для ввода в колонку - в водно-ацетонитрильной смеси, близкой к анализируемым пробам и контрольному раствору. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
voodensky Пользователь Ранг: 531 |
14.10.2019 // 13:56:08
Редактировано 1 раз(а) Колонку жалко. Я вот почему обратил на это внимание. Например, Вы работаете на хроматографе для ультра ВЭЖХ и там объем смесителя 50 или 100 мкл. Вопросов нет. Или Вы работаете на обычном ВЭЖХ и объем смесителя 0,5 мл или вообще 2,6 мл. И теперь считайте, что для заполнения только объема смесителя (без идущих трубочек) требуется 2,5 минуты. За 10 мин вы всего лишь промываете 4 объемами (если 0,5 мл). Если 2,6 то вы его вообще даже не заполняете. Поэтому в Вас и условия разные. Там где должно быть 95% ацетонитрила, его по факту меньше. Там где должно быть 15% ацетонитрила, его по факту больше. Чтобы это проверить возьмите 3 раза прогоните программу вообще без заколов. |
||
|
ukvukv Пользователь Ранг: 134 |
14.10.2019 // 16:46:19
Редактировано 1 раз(а) Благодарю! Без заколов это как? Объём пробы поставить 0 мкл? Смеситель это петля? Спасибо, пытаюсь осознать, что-то интересное. |
||
|
voodensky Пользователь Ранг: 531 |
15.10.2019 // 8:40:55
В прошлом посте был намек, на то, что неплохо было бы сказать на какой системе работаете. На Шимадзу надо поставить номер виалы -1 и он будет анализировать без вкола. На Вотерсах есть отдельный тип анализа "no injection". Или можно просто создать метод, в котором будут объеденены три цикла градиентных цикла. А еще проще проверить можно так. Когда будет стабильное время выхода перед следующим анализом на начальных условиях подождать не 10 мин, а 30 мин и посмотреть, что будет со временем. Или если будет много времени, повторить запуск. Так же включить поток 100% ацетонитрила и проделать те же действия, что обычно перед анализом. Если картина повторится, то дело не в недельном простое, а в условиях. Нет, смеситель - это смеситель. Смотря на какой системе работаете. В общем, это некоторая вещь, сразу после насоса (если градиент низкого давления) и перед портом ввода, на которой написан объем. Чтобы понять о чем я говорю, представьте неработающий (не смешивающий) смеситель объемом 8 мл. Вы начинаете анализ, проводится ввод пробы, насос начинает изменять соотношение. После насоса раствор идет в смеситель, потом на порт вввода, потом на колонку. Смеситель у нас объемом 8 мл (как договорились). На скорости 0,2 мл в минуту раствор дойдет до порта ввода и колонки через 8мл / 0,2мл/мин=40 мин. Все это время вещество находится в сорбированном состоянии на входе колонки. Через 40 мин на входе в колонке начинает расти доля ацетонитрила и вещество начинает элюироваться. Поэтому в первом заколе ничего нет. На втором заколе будет то, что введено на первом заколе, и т.д. Это идеальная придуманная ситуация, но ясность надеюсь она внесла. Еще как вариант посмотреть давление. Если колонка заполнена одним раствором, то давление постоянное. Т.е. на первых трех экспериментах и на остальных форма изменения давления должна быть одинакова. Но это отражает факт заполнение колонки, а не ее уравновешивание. |
||
|
ukvukv Пользователь Ранг: 134 |
18.10.2019 // 0:56:45
Редактировано 24 раз(а) VMU, извините, сначала сделал, а потом прочитал в форуме, что Вы порекомендовали. Но даже, то что сделал наводит на глубокие рассуждения вечного "что делать?" дальше. Сток чистого CBZ сделал в МеОН, рабочую концентрацию так же развёл МеОН. На пробы пациентов совсем не похоже: ни воды, ни ACN. Однако смотрите файлы. https://ru.files.fm/u/fdzzdjqb#;/share_popup Пришлите, пожалуйста, почту. Я не понимаю, как здесь вставлять ссылки и картинки. |
||
|
ukvukv Пользователь Ранг: 134 |
18.10.2019 // 1:30:03
Как? как это здесь работает? Первый раз не могу отправить ни ссылки ни картинки. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 69
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
