Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Колонка после недельного простоя - что с ней происходит? >>>

  Ответов в этой теме: 48
  Страница: 1 2 3 4 5
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Колонка после недельного простоя - что с ней происходит?
ukvukv
Пользователь
Ранг: 117

12.09.2019 // 22:40:04     
Редактировано 1 раз(а)

Всем доброго!
В течение недели накапливаю пробы и затем разом делаю и пробоподготовку и заколы в ВЭЖХа. Т.е. насос, детектор, термостат системы находятся в режиме ожидания. Первыми в последовательности идут холостая проба и контрольная. Так вот: контрольная проба, с известным веществом и с заданной концентрацией этого же вещества, полноценным пиком выходит только после третьего закола. В первом заколе вообще пусто, во втором появляется какой-то горбатый пик и только с третьего закола появляется полноценный пик и подтверждается расчётная концентрация.
Последняя проба в последовательности это ACN и градиент заканчивается 100% ACN, т.е. колонка перед отключением системы на неделю заполняется ACN.
А вопрос собственно в названии темы: Колонка после недельного простоя - что с ней происходит? или вечное "Чтоделать?".
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1040


12.09.2019 // 23:33:16     
Редактировано 1 раз(а)


ukvukv пишет:
... Т.е. насос, детектор, термостат системы находятся в режиме ожидания. ... В первом заколе вообще пусто, во втором появляется какой-то горбатый пик и только с третьего закола появляется полноценный пик и подтверждается расчётная концентрация.
... колонка перед отключением системы на неделю заполняется ACN...

Не совсем понятно. что подразумевается под "режимом ожидания"?
У меня в термостате могут находиться 1-2 колонки (если позволяют условия текущего анализа), остальные сняты и хранятся в коробках.

Это нормально для градиентного элюирования 1-2 прогона градиента перед серией анализов для выхода на рабочий режим. Иногда, для повышения чувствительности делаю даже 3 прогона.
Это обусловлено тем, что за время хранения микропримеси глубоко проникают в поры сорбента. При первом прогоне повышается давление в колонке и даже "несжимаемые" сорбенты сжимаются, выбрасывая из пор микропримеси, которые элюируются к концу цикла. Повторный прогон градиента имеет те же последствия, поскольку так же сопровождается изменением давления системе. На 3-м прогоне эффект "вымывания" уже незаметен.
Совет, хранить колонки лучше в начальном "градиенте".
Andrew
VIP Member
Ранг: 1276


17.09.2019 // 14:16:19     
Редактировано 1 раз(а)


ukvukv пишет:

Последняя проба в последовательности это ACN и градиент заканчивается 100% ACN, т.е. колонка перед отключением системы на неделю заполняется ACN.
А вопрос собственно в названии темы: Колонка после недельного простоя - что с ней происходит? или вечное "Чтоделать?".

Уточните, в течение какого времени Вы уравновешиваете колонку с подвижной фазой начального состава перед первым вводом?
Andrew
VIP Member
Ранг: 1276


17.09.2019 // 14:18:29     
Редактировано 1 раз(а)


OldBrave пишет:

Совет, хранить колонки лучше в начальном "градиенте".

Даже если это 5% АСN в фосфатном буфере с рН 6,5?
valerra
Пользователь
Ранг: 135


17.09.2019 // 15:22:06     

ukvukv пишет:
... контрольная проба, с известным веществом и с заданной концентрацией этого же вещества, полноценным пиком выходит только после третьего закола.

Так иногда случается, что в ВЭЖХ анализе необходимо насытить колонку аналитом. Если контрольная проба после насыщения даёт правильные результаты для нескольких концентраций, то я бы просто прописал процедуру насыщения колонки перед проведением анализа и больше не задумывался над этим вопросом.
Avet
Пользователь
Ранг: 729


17.09.2019 // 15:32:10     
Редактировано 1 раз(а)


ukvukv пишет:
Всем доброго!
В течение недели накапливаю пробы и затем разом делаю и пробоподготовку и заколы в ВЭЖХа. Т.е. насос, детектор, термостат системы находятся в режиме ожидания. Первыми в последовательности идут холостая проба и контрольная. Так вот: контрольная проба, с известным веществом и с заданной концентрацией этого же вещества, полноценным пиком выходит только после третьего закола. В первом заколе вообще пусто, во втором появляется какой-то горбатый пик и только с третьего закола появляется полноценный пик и подтверждается расчётная концентрация.
А валидация методики проводилась? Все эти "приколы" должны найти свое отражение в валидационных материалах
Да вопрос простой: методика валидировалась? В материалах валидации методики все эти "приколы" должны быть отражены.
Последняя проба в последовательности это ACN и градиент заканчивается 100% ACN, т.е. колонка перед отключением системы на неделю заполняется ACN.
А вопрос собственно в названии темы: Колонка после недельного простоя - что с ней происходит? или вечное "Чтоделать?".

Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Термогравиметрический анализатор TA Instruments TGA Q5000IR Термогравиметрический анализатор TA Instruments TGA Q5000IR
Исследовательский термогравиметрический анализатор для самых взыскательных исследователей с уникальной нагревательной системой. Прибор полностью автоматизирован и позволяет работать как в режимах классического ТГА, так в режимах термоудара (нагревание со скоростями более 2000°C/мин), модулированного ТГА и термогравиметрии высокого разрешения.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1040


17.09.2019 // 19:51:59     
Редактировано 2 раз(а)


Andrew пишет:
Даже если это 5% АСN в фосфатном буфере с рН 6,5?
Намекаете, что зарастет флорой и фауной или солями?
Даже 5-10% ACN вполне достаточно для соблюдения стерильности. Что касается фосфатного буфера, они бывают разной ионной силы. Не умеете герметично упаковать колонку или закладываете ее на вечное хранение, или есть сомнения, - флаг в руки!, - предварительно отмывайте от солей... Иногда и сам так делаю.
Avet
Пользователь
Ранг: 729


18.09.2019 // 8:47:03     

Avet пишет:

ukvukv пишет:


А валидация методики проводилась? Все эти "приколы" должны найти отражение в валидационных материалах
Шушечка
Пользователь
Ранг: 405


19.09.2019 // 6:01:26     

ukvukv пишет:
Всем доброго!
В течение недели накапливаю пробы и затем разом делаю и пробоподготовку и заколы в ВЭЖХа. Т.е. насос, детектор, термостат системы находятся в режиме ожидания. Первыми в последовательности идут холостая проба и контрольная. Так вот: контрольная проба, с известным веществом и с заданной концентрацией этого же вещества, полноценным пиком выходит только после третьего закола. В первом заколе вообще пусто, во втором появляется какой-то горбатый пик и только с третьего закола появляется полноценный пик и подтверждается расчётная концентрация.
Последняя проба в последовательности это ACN и градиент заканчивается 100% ACN, т.е. колонка перед отключением системы на неделю заполняется ACN.
А вопрос собственно в названии темы: Колонка после недельного простоя - что с ней происходит? или вечное "Чтоделать?".

Я так понимаю, что колонка вообще с хроматографа не снимается? И она стоит не законсервирована.... нуууу не знаю))) все таки надо бережно относиться к аппаратуре и расходникам.
voodensky
Пользователь
Ранг: 26


19.09.2019 // 9:40:46     

ukvukv пишет:
Всем доброго!
что с ней происходит? или вечное "Что делать?".

Стоит еще уточнить, что за колонка. Может это С18 с привитыми полярными или гидрофильными группами.
А методика с ион-парным реагентом или триэтиламином.
ukvukv
Пользователь
Ранг: 117


20.09.2019 // 16:11:33     
Редактировано 4 раз(а)


OldBrave пишет:
Не совсем понятно. что подразумевается под "режимом ожидания"?
У меня в термостате могут находиться 1-2 колонки (если позволяют условия текущего анализа), остальные сняты и хранятся в коробках.

Это нормально для градиентного элюирования 1-2 прогона градиента перед серией анализов для выхода на рабочий режим. Иногда, для повышения чувствительности делаю даже 3 прогона.

Совет, хранить колонки лучше в начальном "градиенте".

1.Режим ожидания "stand by" - на оборудовании на кнопках вкл/выкл горят, по моему, жёлтые огоньки. В ChemStation достаточно нажать кнопку "on" и насос, термостат и детектор (UV лампа) включаются и выходят на рабочий режим.
2. У меня тоже в термостате установлены две разные колонки, по мере необходимости. в зависимости от анализа, переключаю потоки подвижных фаз. Остальные колонки заполнены 100% ACN, закупорены и также хранятся в своих коробочках.
3. Заметил ещё один момент.
Если прогонять холостую пробу (100%ACN), даже 3-х кратный повтор, не выводит колонку на рабочий режим, т.е. колонке необходим именно определяемый аналит и именно его 3-х кратный прогон. Кстати, об этом кто-то выше написал, что идёт насыщение колонки определяемым аналитом, что для меня стало открытием.
4. Колонки храню согласно прилагаемой инструкции, и обычно это 100% ACN. А фосфатный буфер и муравьиная кислота очень хорошие вкусняшки для наших меньших братьев. Хотя не буду утверждать, что как Вы предполагаете 5-10% ACN достаточно для того чтобы ни кокки, ни палочки, ни грибы не завелись.

  Ответов в этой теме: 48
  Страница: 1 2 3 4 5
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты