| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Можно ли в хроматограф (ОФ ВЭЖХ) вводить гексановые экстракты? >>>
|
 |
|
Андрейвладими Пользователь Ранг: 139 |
 15.06.2012 // 19:15:47
Редактировано 1 раз(а) Всем доброго времени суток. Почитал я главным образом теоретическую дискуссию и, принимая во внимание наличие единственной синтетической задачи, которую надо решить до отпуска, решил экспериментально проверить, можно ли колоть гексановые растворы при ОФ хроматографии. Выбрал свою стандартную систему для тестирования колонок -~65%MeCN/35%H2O. Колонка - Gemini 5u C18 4.6*100, сильно б.у., 1 мл/минуту. тестовые смеси: 1) 0.1М бензол\толуол\этилбензол в -~80%MeCN/20%H2O 2) 0.1М бензол\толуол\этилбензол в гексане. При заколе 2 - 15 мкл смеси 1) (0.1М в MeCN/H2O) времена удерживания (в минутах) воспроизводимы и составляют: бензол - 2.48+\-0.01 толуол - 3.04+\-0.01 этилбензол - 3.66+\-0.02 При заколе 2 - 15 мкл смеси 2) (0.1М в гексане) времена удерживания (в минутах) не воспроизводимы, увеличиваются с увеличением объёма пробы и составляют: бензол - 2.53 - 2.67 толуол - 3.08 - 3.42 этилбензол - 3.83 - 4.44. Кроме того а) по мере увеличения объёма пробы на хроматограмме появляются дополнительные горбы и пики и хроматограмма постепенно превращается в порнограмму, б) Время выхода при вколе 2 мкл сильно зависит от времени, прошедшего с предыдущего вкола, особенно если объем этого предыдущего вкола велик. Вывод из убитых на это дело нескольких часов: Вводить пробу в виде гексанового раствора при работе на С18 в системе MeCN/H2O можно, но времена удерживания свободно плавают + появляются дополнительные пики и горбы. P.S. Отдала одна моя сотрудница реакционную смесь на LC/MS, посмотрела результат и говорит -Похоже, что у меня всё умерло Посмотрел, призадумался и спросил -А как ты готовила образец для LC/MS? -Просто отобрала пробу в виалку и отнесла. А реакция та была - нагрев 10% раствора вещества в живом POCl3  . |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Lipids Пользователь Ранг: 459 |
15.06.2012 // 20:11:52
У вас k' ~ 0.1 - 0.3 о какой хроматографии вы вообще говорите?  Поздравляю вас с некоторым временем проведенным рядом с хроматографом - хоть помыли гексаном автосамплер и фрит колоночный (оттуда и пики в ваших порнограммах). |
|||||
|
Андрейвладими Пользователь Ранг: 139 |
15.06.2012 // 20:36:32
У вас k' ~ 0.1 - 0.3 о какой хроматографии вы вообще говорите? Поздравляю вас с некоторым временем проведенным рядом с хроматографом - хоть помыли гексаном автосамплер и фрит колоночный (оттуда и пики в ваших порнограммах). У меня k' =1.18 - 2.5 (t0 = 1.1 минута)  .
|
|||||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
15.06.2012 // 21:12:41
Lipids, бесполезно. Чел доказал несостоятельность этого приема на деле. |
|||||
|
cholesterol Пользователь Ранг: 109 |
15.06.2012 // 22:15:24
Внесу свою лепту. Во многих случаях применение несовпадающих элюента в подвижной фазе и растворителя для пробоподготовки не нарушает нормальную работу хроматографа. Вместе с тем, в десятках публикаций указывается, что использование для пробоподготовки растворителя, более сильного или более слабого, чем подвижная фаза, может нарушить разделение [ Напрашивается общий вывод: использовать для ввода пробы растворитель, отличный от подвижной фазы,– значит создавать почву для неприятностей. И лишь в некоторых случаях этот эффект не проявляется. Когда проба попадает в хроматограф, анализируемые вещества выводятся из раствора и смешиваются с подвижной фазой. В лучшем случае, проба формируется в виде узкой зоны в начале колонки. Если повторное растворение пробы протекает быстро, получаются пики с хорошим профилем. Если определяемые вещества выводятся из растворителя, образуя несколько зон, кинетика их растворения в подвижной фазе начинает существенно влиять на время элюирования, в результате получаются неудовлетворительные пики. Профили пиков будут в этом случае зависеть также и от концентрации анализируемых веществ в пробе. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Lipids Пользователь Ранг: 459 |
16.06.2012 // 0:32:56
Хорошо. Зафиксируем. В понедельник проверим ваши результаты.
|
|||||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
16.06.2012 // 4:19:05
Я, конечно, дико извиняюсь. А свои, за 30 лет, проверять не станете? 
|
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
16.06.2012 // 18:00:44
Редактировано 1 раз(а) Посмотрите еще воспроизводимость площадей пиков – с гексаном должно быть хуже, так же проверьте эффективность и ассиметрию пиков. Интересно, а что будет через 100 вколов, через 1000? На реальных объектах? Согласитесь, это неверный вывод – справедливо (и то с оговорками) для испытуемых аналитов и хром. системы и соотв. условий. |
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
16.06.2012 // 18:03:17
Редактировано 1 раз(а) Это еще минимум "сюрпризов". Ухудшение хром. параметров пиков, а так же воспроизводимости абс. времен удерживания и площадей пиков, артефакты, изменение разрешения, дискриминация хром. полосы различного генеза (деформация форм пиков), контаминация хром. системы, необратимое изменение физ.-хим. свойств сорбента колонки, выпадение осадков в ячейке детектора, в инжекторе и т.д. и т.п. Оно нам надо? Конечно же нет. |
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
16.06.2012 // 18:13:18
Редактировано 2 раз(а) Почему "во всем мире" люди делают реконструкцию (перерастворяют в подходящем растворителе)? Видели Вы хотя бы одну официальную методику анализа или статью в рецензируемом журнале с нормальным импактом, где использовался бы такой подход (ввод пробы в растворителе, не смешивающемся при н.у. с элюентом)? Почему? Неужели Lipids открыл что-то новое "сто лет" назад? Почему тогда этот подход не распространен повсеместно? А может это заблуждение/невежество и/или косность? Или, просто отсутствие необходимых реактивов, материалов и оборудования? Или то и другое? Были ли попытки решить задачу "классическим" способом и к чему они привели? К чему эти "извращения"? Например (первое, что попалось): С другой стороны мы, не знаем точные аналитические задачи Lipids, не видели хроматограмм, не знаем, какие критерии качества он использует, проводил ли он исследования, чтобы выяснить "эффект гексана" и что вообще его привело к такому решению задачи и т.д., но т.к. его все устраивает, то… В любом случае, он сам себе судья. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 115
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
