| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Странности в ВЭЖХ, помогите разобратся >>>
|
 |
| Автор | Тема: Странности в ВЭЖХ, помогите разобратся | |||||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
 18.01.2005 // 18:44:32
Всем доброго времени суток! Собственно вот такая интересная ситуация возникла при анализе ВЭЖХ сибазона (диазепама). При использовании в качестве разбавителя исходного ампульного 0,5% раствора, фосфатного буфера с рН=3 и последующем анализе в изократике при 50% этого же буфера и 50% ацетонитрила, наблюдаются два пика, с отношением площадей примерно 1/2, различающиеся по спектральным х-кам. В то время как при том же анализе, но при разбавлении исходного раствора не буфером, а подвижной фазой (т.е. с 50% а-нитрила), наблюдается один пик, на месте второго лишь небольое возмущение. Прибор анализа - Миллихром А-02, колонка Prontosil 120-5-C18 AQ диаметр 2 мм, длина 75 мм, размер частиц 5 мкм. Может кто знает чего это такое, заранее спасибо... |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
18.01.2005 // 19:04:53
БДП довольно нестойкие в-ва. В ампуле может быть какой-то продукт распада. Если снимал спектры, то где максимумы у одного и другого пиков? А лучше, зашли по мэйлу ud_av ( ) pisem.net. эта ситуация воспроизводится? Уверен, что не грязь из посуды или реактивов? Я делал сибазон на Милихроме при рН3, но с ТФУ и в градиенте. Таких странностей не наблюдал. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
18.01.2005 // 19:09:03
Правда интересно. 1. Сравните эффективность этого дополнительного пика с паспортной эффективностью. 2. Какие у него спектральные характеристики? Каково время удерживания сибазона и хитрого пика? 3. Что значит "возмущение"? Как оно выглядит? |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
18.01.2005 // 19:13:24
Да, Андрей. Помню, я делал диазепины, но только с серой, а не кислородом. Те вообще в кислом буфере гидролизовались, пришлось делать в нормальной фазе на нитриле. Да, фокусы вряд ли... скорее и правда - примесь, или продукт развала... |
|||||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
18.01.2005 // 19:40:10
Спасибо за ответы. Да нет, не продукт распада это, ведь если просто заливать буфером, то два пика, тот же буфер, но с добавкой 50% а-нитрила, и нету пика, кроме того МСД не показывает каких-либо иных веществ. А то, что я назвал возмущение, это тот же пик, скорее всего, только очень маленький. Да, а насчёт спектров такая ситуация: Тот который то появляется то исчезает это точно не совпадает с милихромовской базой ВЭЖХ-УФ, ну а второй, который постоянный, он совпадает по спектральным характеристикам. |
|||||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
18.01.2005 // 19:56:27
А вообще эта ситуация мне напомнила, ту что мне показывали в Москве на стажировке. Там при исследовании кажется метанольного раствора кажется морфина основания, также при разбавлении буфером появлялся ещё один пик, однако если исходный раствор разбавить, то дополнительный пик исчезал почти совсем. Там это кажется объясняли существованием двух форм: протонированной и нет. То есть если вещества в исходном (разбавленном) растворе мало, то он весь протонирован за счёт кислотности фосфата, а если нет, то есть две формы, то есть протонов на всех не хватает. Ну а тут... как а-нитрил на кислотно-основное равновесие может влиять? Стабилизирует от что-ли форму основания? Кстати тот пик, который лишний он раньше истинного выходит. И его спектр смещён в коротковолновую область... Может проблема где-то здесь? |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Костя Пользователь Ранг: 576 |
18.01.2005 // 19:57:54
это противоречит принципам химического равновесия, интересно кто это вам такое сказал??? |
|||||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
18.01.2005 // 20:00:51
Что именно противоречит |
|||||
|
Костя Пользователь Ранг: 576 |
18.01.2005 // 22:39:15
Редактировано 1 раз(а) ионная и неионная форма не могут выходить разными пиками, они выходят одним. Понимаете ли, в хроматографии есть базовый принцип - одно вещество не может выходить двумя пиками, в то время как два могут выходить одним (пиком). Казалось бы простая фишка, а вокруг неё построен такой раздел АХ как хроматография... |
|||||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
18.01.2005 // 22:58:33
Вообще-то, у Сычева С.Н. (если не ошибаюсь) есть целая теория уширения и хвостообразования пиков, как неполного разделения равновесных форм слабого электролита. Неплохо, если бы он отозвался. |
|||||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
18.01.2005 // 23:01:22
А одним ли веществом являются аммиак и ион аммония? |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 146
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
