| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Странности в ВЭЖХ, помогите разобратся >>>
|
 |
|
G.Baram VIP Member Ранг: 211 |
 12.02.2005 // 20:11:51
Уважаемый Islander! Спасибо, что произвели меня в "авторитеты", но истина дороже. Сильно сомневаюсь, что таутомеры могут разделяться так хорошо. Судите сами, Rs(2,1)=7.6; Rs(3,2)=4.8. Почти уверен, что это либо бензоат, бензиловый спирт и т.д. или распад. Ведь пики 1 и 2 со временем увеличиваются. Если Корвет запишет из одной пробирки 4-5 хроматограмм чере 2-10 часов, то мы все узнаем. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
12.02.2005 // 20:29:46
Угу, непременно запишу, только уж не 10 часов, а наверное сразу 72 часа возьмём, так как растворы с пятницы стоят. Во всяком случае сразу видно будет что поменялось. Если соотношение пиков в безацетонитрильном растворе не поменялось, то это наверное либо не распад, либо он обратим, так как равновесие устанавливается. Вообще, не знаю я насчёт распада. Просто я до этого ампулы на МСД делал был только один пик - сибазон, прекрасно совпадающий по масс-спектру. Ведь если бы вещество такое "нежное" было, в жёстких условиях газовой хроматографии оно бы уж точно развалилось. А вообще есть ещё один нюанс. Когда я делал этот сибазон на ГХ-МС вылезла весьма приличная гребёнка веществ, похожих по масс-спектру на краун-эфиры. Может в данном случае это здесь и есть "подходящий растворитель". А вообще конечно пришло время поиздеватсья над "Миллихромом" скрещивая его с МСД. Тогда каждый пик вырежем, и посмотрим, если получится. |
||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
12.02.2005 // 20:33:58
Так тут вообще три пика! Да и делятся, конечно, слишком сильно для близких по структуре веществ... |
||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
12.02.2005 // 20:35:56
ПЭГ, небось... |
||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
12.02.2005 // 20:58:28
Если вы о полиэтиленгликоле с колонки, то это исключено, ибо она неполярная, DB-5MS, собственно. Во всяком случае раньше краун-эфиров я не видел. А пика действительно три (уж простите сразу утаил, точнее не придал должного значения). Просто третий пик очень мал, очень размазанный (что-то около полминуты, если я не ошибаюсь), и имеет такую особенность, что совпадает с прилагаемой к миллихрому базой данных ВЭЖХ-УФ, как диазепам. Не знаю помоему без таутомерииздесь не обойтись, хотя бы 2 пика, но ей связаны. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
G.Baram VIP Member Ранг: 211 |
12.02.2005 // 21:07:46
Такую стыковку недавно сделали в Институте аналитического приборостроения РАН (С.-Петербург). Милихром соединили с ES и MALDI времяпролетным масс-спектрометром. Результат на пептидах отличный. Как Вы увидите в одном эксперименте аналиты-катионы и аналиты-анионы? |
||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
12.02.2005 // 21:08:19
Редактировано 2 раз(а) Нет, я не о колонке. Многие лекформы содержат низкомолекулярные полиэтиленгиколи и их эфиры - tween или polysorabate, используемые в качестве эмульгаторов и дающие характерные гребенки пиков. Кстати, известно, что поверхостно-активные вещества способны смещать таутомерные равновесия, да простит меня Григорий Иосифович. |
||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
13.02.2005 // 12:42:45
К сожалению Григорий Иосифович, мы такую сложность как в Иркутске сделать не сможем. я планирую так сделать: во первых попробовать увеличить ввод пробы до 5-6 мкл, а то и больше, если пики не сильно расплывутся, тогда точно посмотреть время выхода каждого пика, отсоединить колонку от детектора и собрать фракции с определённым временем выхода. Потом самое сложное. надо будет перевести вещество в неполярную фазу. Пока у меня такая идея: упарить аккуратно совместно с каплей аммиака, а потом остаток хлороформом обработать, ну и вколоть на ГХ-МС. Кстати если известно время выхода пика на хроматограмме, то то сильно ли это время различается со временем входа вещества в детектор, я думаю что не более секунд где-то, да? Конечно катионную и анионную формы вещества я не различу так (как и таутомеры), но хотя бы можно будет точно сказать имеет место быть распад, либо какие-то другие примеси (бензоаты и пр.) Кстати для бензоатов надо будет ещё и кислую экстакцию сделать. |
||
|
G.Baram VIP Member Ранг: 211 |
13.02.2005 // 13:53:37
Редактировано 2 раз(а) Проще будет установить после детектора короткий капилляр (50-60 мм, внутр. диаметр 0.5 мм) и отбирать элюат после детектора, глядя на монитор. Задержка составит не более 2-3 мкл. Упарить 50-100 мкл раствора досуха можно струей инертного газа (азот, аргон, гелий), который через тонкую иглу надо направлять на поверхность жидкости в микропробирке. Пробирку лучше укрепить в стакане с теплой воды (40-50 градусов). Скорость упаривания около 25-50 мкл/мин. Чтобы избежать образования пузырьков в ячейке детектора хроматографировать лучше в изократическом режиме с предварительно дегазированным элюентом. Метод проверен многократно - мин нет. Схему устройства для упаривания я послал Вам по эл. почте. Успехов! |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
14.02.2005 // 13:18:18
У меня "тионовые" диазепины разваливались в кислом ТЭА буфере, пришлось делать в нормально-фазовом варианте... |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 146
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
