Avet
Пользователь
Ранг: 1086
|
 24.11.2020 // 10:26:15
voodensky пишет:
Юлия84 пишет:
начальная концентрация 4%, оставляю на ночь с потоком 0,1.
А как уравновешиваете с утра?
Я бы порекомендовал, чтобы утром перед Вашим приходом на работу (началом заколов градуировочных растворов) хроматограф сделал бы 5-7 градиентных циклов.
Да, да, да!!! Именно так. Может хватит и три, а может не хватит и 10. Ион-парный реагент должен "разместиться" в гидрофобной цепи привитой фазы, оставив торчать наружу свой отрицательно заряженный хвост, на котором будет удерживаться аналит, который в Вашей кислой среде перешел в органический катион. Может в это состояние будут переходить несколько аналитов. Дело именно в уравновешивании, так как уже упоминалось, ион-парный реагент и градиент - вещи весьма трудно совместимые.
|
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
|
|
voodensky
Пользователь
Ранг: 531
|
24.11.2020 // 10:37:57
Редактировано 1 раз(а)
Юлия84 пишет:
voodensky пишет:
SergeyK пишет:
SergeyK пишет:
На стандартах какое ОСКО?
Я настойчивый
Добрый день! А можно я вам в личку на почту, например, вышлю скрины градуировки? только у меня по одному вколу каждая концентрация
Лучше текстом, чтобы не перепечатывать 
А к чему такая секретность? Методика опубликована, применять ее без покупки нельзя (в аккредитованной лаборатории), объекты анализа пока не интересны...
|
Светлана1994
Пользователь
Ранг: 49
|
24.11.2020 // 22:35:37
свой отрицательно заряженный хвост, на котором будет удерживаться аналит, ко
Незнание основ физической химии: что такое ионная пара, что такое ДЭС (двойной электрический слой). Неумение говорить на русском языке.
|
Светлана1994
Пользователь
Ранг: 49
|
24.11.2020 // 22:38:27
Все в градуировочках копаетесь? Поджидаете в засаде хорошей инжекции? Ну ну веселые все-таки вы все ребята...
|
SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168
|
25.11.2020 // 3:09:58
Светлана1994 пишет:
Незнание основ физической химии: что такое ионная пара, что такое ДЭС (двойной электрический слой).
Гельмгольца со Штерном нам тут хватит или Гуи с Чепменом будем звать?
|
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246 |
|
Шушечка
Пользователь
Ранг: 518
|
25.11.2020 // 5:25:41
Светлана1994 пишет:
Все в градуировочках копаетесь? Поджидаете в засаде хорошей инжекции? Ну ну веселые все-таки вы все ребята...
дело не в градуировке абсолютно.. можно и по одной-двум точкам спокойно понять что к чему.
Еще раз повторюсь:
- дело в экстракции
- дело в насыщении колонки и не более...
Если даже сделать градуировку по трем точкам: 80, 100 и 120 процентов, уже понятно что график линеен... а вот вопроизводимость на премиксах плюс/минус лошадь, вот отсюда и надо плясать.
|
Шушечка
Пользователь
Ранг: 518
|
25.11.2020 // 5:27:28
Юлия84 пишет:
Добрый день!
Проводим исследования водорастворимых витаминов в премиксах и комбикормах на ВЭЖХ производства Шимадзу. По методике Аналита. Колонка Agilent Rx C18. Подвижная фаза буфер (1.5 г гептасульфонат+2,5 калий фосфорнокислый однозамещенный+40мл ацетонитрила)+ацетонитрил. Градуировочные растворы выходят идеально, калибровка с коэффициентом 0,999999. Но результаты образцов скачут, то в большую степень то в меньшую. не могу добиться воспроизводимости. Подскажите, что делать? 2 месяца бьюсь!!!!
Вы можете оставить свою почту? Форум к сожалению переходит на личности, а мне это жуть как не нравится... давайте лучше по делу, так будет рациональнее и конструктивнее.
|
voodensky
Пользователь
Ранг: 531
|
25.11.2020 // 8:35:25
Редактировано 1 раз(а)
Шушечка пишет:
Светлана1994 пишет:
Все в градуировочках копаетесь? Поджидаете в засаде хорошей инжекции? Ну ну веселые все-таки вы все ребята...
дело не в градуировке абсолютно.. можно и по одной-двум точкам спокойно понять что к чему.
Еще раз повторюсь:
- дело в экстракции
- дело в насыщении колонки и не более...
Если даже сделать градуировку по трем точкам: 80, 100 и 120 процентов, уже понятно что график линеен... а вот вопроизводимость на премиксах плюс/минус лошадь, вот отсюда и надо плясать.
Хотел сначала согласиться, потом не согласится, а потом запутался.
Юлия84 пишет:
Добрый день!Премикс содержит все вышеперечисленные витамины. Буфер приготовлен по методики. Определяю витамины сразу все четыре, соответственно и калибровка на все 4 витамина в одной (все как в методике). Проба без разведения буфером.
Вот результаты одного образца (пять вколов) факт. содержание В1-15000, В2-2000, В6 - 1000, В1 - 600.
В3 - 12935, 11737, 15727, 15242, 13853
В2 - 1245, 1280, 1878, 1957, 1468
В1 - 762, 666, 819, 736, 502
В6 - 952, 794, 899,897, 702
Вот еще один образец с таким же фактическим содержанием -
В1 - 15877, 14124, 15748, 15982
В2 - 1839, 2042, 1804, 1888, 1936
В1 - 636, 724, 657, 661
В6 - 772, 571, 764, 708, 513
Юлия84 пишет:
SergeyK пишет:
Вводят один и тот же раствор пробы и площади скачут или степень извлечения в параллельных пробах скачет?
Степень параллельных определений скачет
Так что скачет в конечном итоге? Параллельные заколы одного и того же раствора, или параллельные экстракции одного и того же образца?
По первой цитате выходит, что скачут заколы, по второй - параллельные экстракции.
Соответственно, если скачут заколы - в первую очередь думать про методику, работу прибора и насыщение колонки.
Если скачут экстракции - то в думать в сторону корректного экстрагента и вариации методики в рамках допустимых по НД. В любом случае, экстракция точно не корректна, но сначала нужно разобраться с СКО. При таких значениях (если это параллельные заколы), идти на оптимизацию экстракции малоперспективно.
|
Юлия84
Пользователь
Ранг: 77
|
25.11.2020 // 8:42:24
voodensky пишет:
Шушечка пишет:
Светлана1994 пишет:
Все в градуировочках копаетесь? Поджидаете в засаде хорошей инжекции? Ну ну веселые все-таки вы все ребята...
дело не в градуировке абсолютно.. можно и по одной-двум точкам спокойно понять что к чему.
Еще раз повторюсь:
- дело в экстракции
- дело в насыщении колонки и не более...
Если даже сделать градуировку по трем точкам: 80, 100 и 120 процентов, уже понятно что график линеен... а вот вопроизводимость на премиксах плюс/минус лошадь, вот отсюда и надо плясать.
Хотел сначала согласиться, потом не согласится, а потом запутался.
Юлия84 пишет:
Добрый день!Премикс содержит все вышеперечисленные витамины. Буфер приготовлен по методики. Определяю витамины сразу все четыре, соответственно и калибровка на все 4 витамина в одной (все как в методике). Проба без разведения буфером.
Вот результаты одного образца (пять вколов) факт. содержание В1-15000, В2-2000, В6 - 1000, В1 - 600.
В3 - 12935, 11737, 15727, 15242, 13853
В2 - 1245, 1280, 1878, 1957, 1468
В1 - 762, 666, 819, 736, 502
В6 - 952, 794, 899,897, 702
Вот еще один образец с таким же фактическим содержанием -
В1 - 15877, 14124, 15748, 15982
В2 - 1839, 2042, 1804, 1888, 1936
В1 - 636, 724, 657, 661
В6 - 772, 571, 764, 708, 513
Юлия84 пишет:
SergeyK пишет:
Вводят один и тот же раствор пробы и площади скачут или степень извлечения в параллельных пробах скачет?
Степень параллельных определений скачет
Так что скачет в конечном итоге? Параллельные заколы одного и того же раствора, или параллельные экстракции одного и того же образца?
По первой цитате выходит, что скачут заколы, по второй - параллельные экстракции.
Соответственно, если скачут заколы - в первую очередь думать про методику, работу прибора и насыщение колонки.
Если скачут экстракции - то в думать в сторону корректного экстрагента и вариации методики в рамках допустимых по НД. В любом случае, экстракция точно не корректна, но сначала нужно разобраться с СКО. При таких значениях (если это параллельные заколы), идти на оптимизацию экстракции малоперспективно.[/quote
Скачут результаты параллельных заколов
|
Юлия84
Пользователь
Ранг: 77
|
25.11.2020 // 8:42:52
Шушечка пишет:
Юлия84 пишет:
Добрый день!
Проводим исследования водорастворимых витаминов в премиксах и комбикормах на ВЭЖХ производства Шимадзу. По методике Аналита. Колонка Agilent Rx C18. Подвижная фаза буфер (1.5 г гептасульфонат+2,5 калий фосфорнокислый однозамещенный+40мл ацетонитрила)+ацетонитрил. Градуировочные растворы выходят идеально, калибровка с коэффициентом 0,999999. Но результаты образцов скачут, то в большую степень то в меньшую. не могу добиться воспроизводимости. Подскажите, что делать? 2 месяца бьюсь!!!!
Вы можете оставить свою почту? Форум к сожалению переходит на личности, а мне это жуть как не нравится... давайте лучше по делу, так будет рациональнее и конструктивнее.
lashkool{coбaчkа}mail.ru
|
[]
