| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Странности в ВЭЖХ, помогите разобратся >>>
|
 |
|
G.Baram VIP Member Ранг: 211 |
 11.02.2005 // 14:36:57
Дорогой Костя! Я никоим образом не покушаюсь на Ваши право, а лишь призываю пользоваться им корректно. Корвет в первом посте написал, что работает на "Милихроме А-02", а Вы нам сообщаете, что Сергей Николаевич больше колонки не набивает, а в Орле делается бог весть что. Что касается системы вода-ацетонитрил, то Вы правы - максимальная вязкость смеси при составе около 90:10 и мицеллобразование проявляется в наиболшей степени именно в этом диапазоне концентраций. Я не претендую на "правильное" объяснение раздвоения пика диазепама, а лишь надеюсь, что оно "правдоподобное". Надо ли исследовать этот эффект подробно, пусть каждый решает сам. И последнее (для справки). В Милихроме А-02 объем капилляра между инжекционной иглой и колонкой составляет (мертвый объем) составляет 1 мкл и его нельзя назвать "большим". По-моему, в самый раз. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
G.Baram VIP Member Ранг: 211 |
11.02.2005 // 14:56:19
Я писал о другом (признаю, коряво). Повторю другими словами. Во время смешивания пробы с подвижной фазы имеет место градиент рН по зоне. Молекулы, находящиеся в растворе с разными значениями рН двигаются с разными скоростями, которые определяются соотношение протонированной и свободной форм. Это приводит к их разделению (раздвоение пика). Скорость диссоциации я не не рассматриваю, т.к. она слишком велика, чтобы на что-то влиять. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
11.02.2005 // 16:13:42
Рад, что недоразумение так быстро обнаружилось  Григорий Иосифович, назвали бы прибор по-другому, а то ведь путаница получается. И может усугубиться, потому как милихром-5 выпускается в третьей модификации тоже с двумя шрицевыми насосами и смесителем (но со старым автосамплером), и это тоже вполне приличная машина. Все посты про милихром и колонки, конечно же, снимаю. Да, о таком возможном объяснении я не знал. Правда, все-таки чудес не бывает, и различие в спектрах может быть только если это другое вещество, или устойчиво существующая в растворе другая форма вещества (что, в принципе, одно и то же). |
|||||
|
albert Пользователь Ранг: 440 |
11.02.2005 // 17:02:47
Господа, давайте вернемся еще раз к моему случаю. Конкретизирую: образец анализируется в градиенте от А до В, растворитель пробы - элюент А, концентрация нормальная (примерно 2мг/мл, УФ-210 в линейном диапазоне), 5мкл, сильное азотсодержащее основание, как правило гидрохлорид, два пика (первый практически не удерживается), разделены до базы и симметричные. При добавлении в пробу TFA или муравьиной к-ты получаем только второй (удерживаемый) пик. После добавления TFA нужно дать образцу постоять, если вколоть сразу - соотношение площадей пиков изменится, но все равно будут присутствовать оба. |
|||||
|
G.Baram VIP Member Ранг: 211 |
11.02.2005 // 23:12:13
Редактировано 1 раз(а) Для количественного объяснения не хватает числовых данных. Рискну предположить, что Ваш "амин" имеет мол. массу около 100. Тогда концентрация его в пробе будет около 20 мМ (2 мг/мл). Но концентрация ТФУ в элюенте 10 мМ. Хроматография - ион-парная, но в первый момент времени трифторацет-аниона не хватает по стехиометрии и часть амина чуть-чуть "проваливается". О таком развитии событий косвенно свидетельствует Ваше наблюдение относительно того, что результат лучше, если взять 20 мМ буфер. Дружеский совет - не упускайте из виду "мелочи". Если они под контролем, то хроматография из Art превращается Science. Из перечисленных Вами фаз С18 я на своем опыте знаю, что Kromasil весьма склонен к коллапсу при содержании воды более 90%. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
11.02.2005 // 23:25:00
Григорий Иосифович! Консультацию на ходу, почти как в чате можно? По А02, градиенту, ТФУ и артифакту. Или по мэйлу лучше с отправкой хроматограммы? |
|||||
|
G.Baram VIP Member Ранг: 211 |
11.02.2005 // 23:25:21
Вопрос, Костя, не по теме форума, поэтому отвечу очень кратко. Милихром пришел в Орел из Новосибирска в 1981 г. Когда мы в 1995 сделали в Германии Милихром А-02 (EnviroChrom), то очень надеялись, что его будет выпускать тот же Научприбор. Время было трудное, и три хроматографа, изготовленные в Орле никак не отвечали современным требованиям к качеству. Постепенно идея производства в Орле сошла на нет и под названием Милихром А-02 прибору жить уже не долго. А жаль. |
|||||
|
G.Baram VIP Member Ранг: 211 |
11.02.2005 // 23:27:24
С хроматограммой, Андрей, конечно предметнее. И подробности манипуляции с пробой не помешают. |
|||||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
11.02.2005 // 23:31:04
Суть в том, что в градиенте АН-0,025 М р-р ТФУ наблюдается мощный пик в районе 600 - 800 мкл. Аналогичные видел в публикациях Г.Г.Ш. и Н-сибирского СМЭ. Откуда он берется и как от него избавиться. |
|||||
|
G.Baram VIP Member Ранг: 211 |
11.02.2005 // 23:38:53
Какие параметры у градиента и как регенируется колонка? |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 146
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
